Determinación de límites de decisión clínica de ciclosporina en sangre en pacientes con trasplante renal / Determination of clinical decision limits of blood cyclosporine in patients with renal transplantation

INTRODUCCIÓN: los límites de decisión o valores de corte son alertas para el diagnóstico médico. Son obtenidos por estudios cuidadosamente diseñados para poder establecer un valor que permita una decisión médica para seguir un tratamiento. OBJETIVO: determinar los límites de decisión clínica de Ciclosporina A en sangre total de pacientes con trasplante renal. Método: para el tratamiento de datos y cálculo de límites de decisión se utilizó una metodología informática y bioestadística con software SPSS de IBM, realizando pruebas de normalidad, pruebas gráficas como Q-Q plots, test de Kolmogorov ­ Smirnov, test de Lillefors y prueba de Shapiro-Wilks. RESULTADOS: el grupo de estudio conformado por pacientes con trasplante renal atendidos durante 2016 a 2019, clasificados por el tiempo de trasplante. Los criterios de aceptación fueron: uso de control de calidad interno, con resultados satisfactorios utilizando cartas control y la detección de datos atípicos mediante la prueba de Grubbs. Obteniendo niveles basales de 0-3 meses 181-241 ng/ml; 3-12 meses 120-147 ng/ml y mayor a 12 meses de 81-119 ng/ml, y para concentración máxima de 1 mes 1193-2025 ng/ml; 2 meses 1379-1765 ng/ml; 3 meses 1060-1556 ng/ml; 4-6 meses 880-1293 ng/ml; 7-12 meses 735-1039 ng/ml y mayor a 12 meses 643-960 ng/ml. CONCLUSIÓN: los límites de decisión clínica obtenidos se ajustan perfectamente a los de la bibliografía con la ventaja de que ahora se tienen límites definidos para nuestra población, constituyéndose en alertas para el diagnóstico médico.

Introduction: decision limits or cut-off values are red flags for medical diagnosis. They are obtained by carefully designed studies to be able to establish a value that allows a medical decision to follow a treatment. OBJECTIVE: to determine the clinical decision limits of Cyclosporin A in whole blood of kidney transplant patients. METHODS: for data treatment and calculation of decision limits, a computer and biostatistical methodology was used with IBM SPSS software, performing normality tests, graphic tests such as QQ plots, Kolmogorov-Smirnov test, lillefors test and Shapiro Test -Wilks. RESULTS: the study group made up of kidney transplant patients treated during 2016 to 2019, classified by transplant time. The acceptance criteria were: use of internal quality control, with satisfactory results using control charts and the detection of outliers using the Grubbs test. Obtaining basal levels of 0-3 months 181-241 ng / ml; 3-12 months 120-147 ng / ml and over 12 months of 81-119 ng / ml, and for a maximum concentration of 1 month 1193-2025 ng / ml; 2 months 1379-1765 ng / ml; 3 months 1060-1556 ng / ml; 4-6 months 880-1293 ng / ml; 7-12 mon-ths 735-1039 ng / ml and more than 12 months 643-960 ng / ml. CONCLUSION: the clinical decision limits obtained are perfectly in line with those of the bibliography with the advantage that now there are defined limits for our population, becoming alerts for medical diagnosis.

Validación del método para la cuantificación de Ciclosporina A en sangre total por HPLC/DAD / Validation of the method for the quantification of cyclosporine a in whole blood by HPLC / DAD

El presente estudio describe la validación del método para la cuantificación de Ciclosporina A en sangre total por Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) en Fase Reversa con Detector de Arreglo de Diodos. La Ciclosporina A es un fármaco inmunosupresor con un estrecho margen terapéutico además de su amplia variabilidad en los procesos farmacocinéticos, justifican su monitorización de dosis a pacientes con trasplantes de órganos para evitar los efectos secundarios y el posible rechazo del órgano trasplantado. La separación de la Ciclosporina A de una matriz compleja como la sangre fue llevada a cabo de manera exitosa utilizando como fase estacionaria una columna C8 5um (250 mm x 4,6mm) o equivalente a L7 según la USP 37, la fase móvil fue una mezcla de acetonitrilo y agua en gradiente, flujo 1.4 ml/min, temperatura de la columna 75ºC y detección con Arreglo de Diodos a 210nm. El método fue validado con los siguientes parámetros: especificidad, linealidad, precisión, exactitud, límite de detección y límite de cuantificación. También se realizó la prueba de aptitud del sistema. El método fue específico para la Ciclosporina A, la respuesta fue lineal en el rango de 100 a 1000 ng/mL de concentración del analito. El valor del coeficiente de variación o desviación estándar relativa (C.V. o DSR) para la precisión fue óptimo. La recuperación media fue de 103,06%. Y el límite de detección y cuantificación resultaron óptimos para la cuantificación de Ciclosporina en sangre total en el rango definido. Finalmente el método cromatográfico nos permitió separar y cuantificar a la Ciclosporina A presente en las muestras de sangre de pacientes con transplante renal.

This study describe the validation method for the quantification of Cyclosporin A in Whole Blood by Liquid Chromatography High Efficiency (HPLC) in reverse phase. Cyclosporine A is immunosuppressant United Nations UN the narrow scam therapeutic margin: In addition to its extensive ¿variability in pharmacokinetic processes justify their monitoring dose Patients with organ transplants paragraph Avoid Side Effects and poaible organ rejection transplanted. Separation of Cyclosporine A of a matrix complex as the blood was carried out successfully using as the stationary phase C8 column, the mobile phase is a mixture of acetonitrile and water gradient, flow 1.4 ml / min, Temperature column was 75 ° C detection 210 nm in one. The method was validated with the following parameters: specificity, linearity, precision, accuracy, limit of detection and limit of quantification. Aptitude Test System was also performed. Was Method Specific for Cyclosporin A, the response was linear in the range 100 a 1000 ng/mL concentration of the analyte. The coefficient of variation or relative standard deviation (RSD or CV) for the precision was optimal. Recovery media WAS 103,06%. And the limit of detection and quantification were optimal for the quantification of total Cyclosporine in blood in the range defined. Finally Chromatographic Method allowed us to separate and quantify Cyclosporin A in samples of patients with renal transplantation.